2023/12/5 15:34:53

單細胞懸液制備儀對肝組織單細胞懸液制備步驟及實驗效果|細胞得率高達90%

來源:上海凈信

單細胞技術已經廣泛應用于腫瘤,免疫,發育生物學,神經科學,細胞治療,藥物研發及動植物研究中。但并不是所有的組織都適用于單細胞RNA測序,現階段單細胞RNA測序研究的一個極大的挑戰仍是如何獲得高質量的單細胞懸浮液??蒲姓邌渭毎麘乙褐苽鋬x具有起始組織量小,時間短,細胞得率高,細胞活性高的特點。帶加熱功能,對樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態,細胞得率高達90%,方便了對真核生物進行單細胞核RNA測序。

此次的實驗樣品為肝組織,肝是人體最大的腺,可分泌膽汁,合成多種蛋白質和脂類物質。肝細胞能進行物質的合成、分解、轉化、貯存。作為消化器官,肝臟參與糖、脂類、蛋白質三大基本物質的代謝。

實驗設備:單細胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK

實驗步驟:

1、打開儀器電源開關,將儀器界面中的模塊加熱和熱板加熱點開,將其兩者先預熱恒溫到37℃左右。

2、將穿刺成長條的樣本剪一部分下來直接放入凈信2ml研磨管中。

3、加入凈信消化酶,旋上蓋子,上下微微晃動研磨管將其組織和消化酶均勻混合。

4、將混合好的研磨管放入加熱模塊中,將其研磨管中的樣品和試劑恒溫至37℃后,再將研磨管放入熱板中,蓋上蓋子。

5、啟動Program 2(25min)

6、待儀器程序時間到之后出現滴滴的提示音,則打開儀器蓋子,取出樣品管

7、將樣品管中的液體和剩下的組織一起倒入過濾管中,然后再加入終止液(避免消化酶將液體中的單細胞也消化完了),得到的液體,即單細胞懸液。

實驗效果:

樣品制備前后效果對比

以上就是此次單細胞懸液制備儀對肝組織的研磨全過程,可供大家進行參考,需要注意是消化酶和終止液均需要在冷凍環境下保存,消化酶解凍時需在常溫條件下解凍,不可以放入水浴或者其他加熱儀器中解凍,溫度升高對酶的活性會有很大的影響。

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